水的硬度分为暂时硬度和永久硬度。
2020年12月21日,我们邀请到了彭涛教授作客高端访谈栏目,伟业计量技术骨干兼特约记者陈志立对彭教授进行了专访,您可以随时进入伟业计量直播间观看精彩访谈。他表示,在国内食品检测行业迅猛发展的背景下,伟业计量也更应抓紧机遇,开拓进取,大力培养检测人才,夯实人才队伍建设,为以后人才竞争的社会中奠定基础,相信在不远的将来,伟业计量将通过自身努力,位列行业顶端。
精彩继续,伟业计量下一期高端访谈中国海关科学技术研究中心研究员、第二届食品安全国家标准评审委员会委员、长期从事食品微生物检验研究工作的曾静老师作客伟业计量高端访谈,敬请期待,我们不见不散。他指出新引入标准方法、非标准方法,超预定范围使用的标准方法三者之间该如何应对处理,并根据目前实验室现状提出实验室资质认定过程中的注意事项。伟业计量全新打造高端访谈栏目,力邀食品检测行业专家教授,对食品安全(化学)分析方法的验证与确认,进行深度解析。彭教授是中国检验检疫科学研究院测试评价中心副主任,同时兼任全国进出口食品安全检测标准化技术委员会(SAC/TC445)秘书长、出入境检验检疫食品化妆品检验标准化技术委员会秘书长等职务。彭教授以理论和自身经验相结合的方式,为我们讲述了食品检测实验室对化学分析方法进行验证和确认的一般性原则
采访中,彭教授对食品检测行业前景作出高度评价。他指出新引入标准方法、非标准方法,超预定范围使用的标准方法三者之间该如何应对处理,并根据目前实验室现状提出实验室资质认定过程中的注意事项。3)磁颗粒状态与数量同时变化的MRS。
更重要的是,其课题组所使用的微型核磁共振仪为快速检测提供了有力的工具。如图2E所示,当小分子目标物存在时,包被在96孔板上的目标物GBSA能够与目标物竞争性结合单克隆抗体(Ab),洗涤并加入碱性磷酸酶(ALP)标记的羊抗小鼠IgG,可得到与目标物成反比的BSAG目标物GAbGIgG(ALP)。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系相关链接:磷酸,催化,检测。此工作通过RTGPCR技术对所提取RNA的目标区域进行特异性扩增,得到大量的单链DNA,此DNA能够被偶联有寡核苷酸捕获探针的聚合微球所捕获,得到聚合微球GDNA,聚合微球GDNA进而与偶联有检测探针的磁颗粒(MNP)结合,得到聚合微球GDNAGMNP,由于大量MNP结合到聚合微球上,可显著降低周围水分子的T2值。
在本方法中,毒死蜱分子会与MNP1000GBSAG毒死蜱竞争性结合二苯并环辛炔(DBCO)修饰的单克隆抗体(AbGDBCO),得到的MNP1000GBSAG毒死蜱GAbGDBCO复合物上具有多个DBCO位点,能够捕获大量的azideGMNP30(DBCO能够与叠氮化物(azide)发生生物正交反应),通过磁分离效率的不同可得到未反应的azideGMNP30(磁颗粒数量变化),通过加入生物交联剂DBCOGPEG4GDBCO进一步诱导DBCO和叠氮化物基团之间的生物正交反应使分散的azideGMNP30聚集(磁颗粒状态变化)。其基本原理是基于大小不同的磁颗粒在同一磁场中的分离速度的差异,将大粒径的磁颗粒作为免疫磁分离的载体,小粒径的磁颗粒作为磁信号探针,通过修饰有给体/受体的载体特异性识别修饰有受体/给体的磁颗粒,经磁分离等操作后,使磁探针数量发生变化,从而实现生物传感。
2)基于磁颗粒数量变化的MRS。miRNA的异常表达可能导致DNA扩增或易位,导致肿瘤增生或转移,其快速准确检测能够为临床诊断及癌症治疗提供重要的参考依据。该方法集样品富集、提取、检测一步完成,整个免疫分析过程能够在30min内完成,操作简单,灵敏度高,具有良好的快速检测的潜力。在检测农兽药残留等小分子有害物质时,农兽药小分子通常只有一个可以和抗体特异性结合的位点,引起的磁信号改变微弱,导致传统MRS灵敏度无法对小分子目标物实现痕量检测。
声明:本文所用图片、文字来源《华中农业大学学报》,版权归原作者所有。(2)聚合微球对目标核酸分子的捕获与富集。miRNA是一种小的、非编码的RNA分子,由大约22个核苷酸组成,参与基因表达的转录和调控。(2)单一抗体对azideGMNP30显示出多个DBCO位点,这将增大由单个靶标诱导MNP30的结合量,从而使信号放大。
Chen等将磁分离(magneticseparation,MS)与MRS相结合,构建了一种基于磁颗粒数量变化的MRS生物传感平台,并成功应用于致病菌与病毒的快速检测(图2B)。关于磁颗粒数量变化介导的MRS生物传感器的研发,国内外均有此方面的报道。
由于磁分离速度的不同,可以轻易地将MNP250G目标物GMNP30与反应体系中未反应的MNP30分离,从而获得未反应的MNP30,对其进行T2信号测定,实现定量分析。Wu等利用碱性磷酸酶介导的点击化学反应作为信号转化与放大系统,构建了双重模式的MRS生物传感器。
该传感器通过生物正交反应将MNPs数量变化引起的信号放大与MNPs状态变化引起的信号放大有机结合起来,实现磁信号的级联放大,有效提高了生物传感器的灵敏度和检测范围。该MRS生物传感器分为两种模式(aMRS和nMRS):aMRS模式是基于MNP30Gazide与MNP30Galkyne经CuAAC催化变为聚集状态,产生T2信号变化。与传统MRS相比,此方法能够在目标物存在的情况下,直接释放MN30,并将其作为信号源进行信号读出,是一种信号打开的方式,稳定性良好。此外,T2信号对磁探针的浓度的改变更为敏感,具有更高的响应,有效提高了MRS传感器的灵敏度。(3)生物交联剂DBCOGPEG4GDBGCO诱导的azideGMNP30聚集,使传感信号进一步放大。该工作通过Cu+催化叠氮化物和炔的1,3G偶极环加成的点击化学反应(CuAAC)诱导磁颗粒的状态变化或调节磁探针数量变化。
ALP能够将磷酸化抗坏血酸(AAP)去磷酸化,生成具有还原性的抗坏血酸(AA),能够将Cu2+还原为Cu+,进而用于CuAAC点击化学反应,使修饰有叠氮分子(azide)的磁颗粒与修饰有炔分子(alkyne)的磁颗粒聚集。此外,2013年,Weissleder课题组基于磁颗粒GDNA探针,结合分子杂交实验,构建了临床样品中致病菌的生物传感器分析系统(图2C)。
此外,释放的miRNA又可以作为目标物进行新一轮的杂交反应,释放MN30,使得信号放大,显著提高传感方法的灵敏度,能够实现尿液样品中miRG21高灵敏的一步检测(5fM),在临床即时诊断方向具有良好的应用前景。毒死蜱因其广谱性,已成为农业生产中广泛使用的有机磷杀虫剂
本研究围绕MRS传感器的传感机制、研究进展、应用领域等方面进行了介绍,并对MRS传感器的发展进行了展望,以期能够促进快速检测技术的进一步发展。在物理学上,弛豫指的是某种平衡状态被破坏后,又恢复到平衡态的过程,用弛豫时间来衡量弛豫过程的快慢。
主要包括电化学生物传感器、光学生物传感器等,但这些生物传感器大多仍然受到精密仪器、检测经济性、样品基质干扰等方面的影响,其性能在快速检测方面尚需进一步提高。(b)信噪比高,将磁颗粒作为磁信号探针,大多数样品中的磁信号可以忽略不计,是一种均相免疫分析方法。MRS传感器是以磁弛豫时间作为读出信号,进行目标物定性定量的快速检测方法,具有检测快速、操作简单、信噪比高、易于实现现场检测等优点,是快速检测领域最受关注的研究方向之一。此外,由于磁颗粒的状态改变容易受到样品基质等多因素的干扰,产生非特异性聚集,导致方法的稳定性较差。
2002年,Weissleder课题组首次报道了磁弛豫现象,当超顺磁纳米颗粒(superparamagneticnanoparticles,MNPs,简称为磁颗粒)在水溶液中的状态(分散或聚集)发生变化时,能够引起其局部磁场均匀性发生改变,形成非均匀局部磁场,而不均匀磁场可加快周围水分子质子的横向弛豫速度,进而缩短横向弛豫时间。Weissleder课题组率先构建了基于磁颗粒状态改变的MRS免疫传感器并用于与人类疾病密切相关的血清中疱疹病毒和腺病毒的快速灵敏检测(图2A)。
氯霉素是一种可以人工合成的广谱性抗生素,滥用的CAP能够通过食物链在人体富集,并产生细菌耐药性、降低免疫力等严重危害。磁弛豫生物传感器(magneticreGlaxationswitching,MRS)亦是近年来多次被报道的生物传感技术之一。
在本方法中ALP的催化放大作用及银颗粒引导的信号产生和读出机制,有效提高了磁弛豫传感器的灵敏度。与传统MRS免疫传感器相比,此传感器的灵敏度提高了50倍,分析性能良好,在有害小分子检测方面具有良好的潜力。
近年来,各种快速检测技术被报道,其中生物传感器备受关注。其中,采用新型的磁颗粒聚集介导信号放大策略能够有效提高生物传感器性能。该方法检出限为5个病毒/10L血清(25%的蛋白),并且由于无需PCR扩增过程,有效提高了检测效率,具有快速、高灵敏等优点。(c)特异性强,基于抗原与抗体的特异性结合,该方法具有良好的特异性。
生物传感器是一种由物理、化学、生物等多学科交叉融合而发展起来的高新检测技术,主要通过生物分子识别元件(如抗体、酶、核酸等)识别目标物,然后利用信号转换器将其转换为光、电、磁等易于捕获识别的信号,进而实现目标物简易高效分析的方法。KaitGtanis等基于同样的原理建立了检测血清和牛奶中副结核鸟分枝杆菌(Mycobacteriumaviumspp.Paratuberculosis,MAP)的磁免疫传感方法,检出限可达到15.5CFUs(colonyformingunits,CFUs),远远低于其他传统的方法。
为解决传统基于磁颗粒状态MRS的局限性,科研工作者开展了大量的工作。我国农业农村部早在2003年第235号公告中就将CAP及其盐、酯类列入禁用药物,并明确规定在所有动物性食品中不得检出CAP。
1磁弛豫生物传感器的介绍磁弛豫生物传感器(MRS)的发展开始于磁纳米颗粒介导的水分子弛豫时间缩短现象的发现。目前,磁弛豫时间传感现象以及相应传感器的开发仍是研究的热点之一。
本文由隔壁老李于2022-12-21发表在极致时空,如有疑问,请联系我们。
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